Kierownik tematu

Prof. nadzw. dr hab. inż. Dorota Pijanowska

Cel realizacji tematu

W hodowlach izolowanych hepatocytów, szybko następuje ich odróżnicowanie, prowadzące do zahamowania ich specyficznych funkcji, takich jak: synteza albuminy i innych charakterystycznych białek, detoksyfikacja amoniaku, aktywność cytochromu P450 itd.

Celem tematu statutowego opracowanie metod i układu umożliwiających ocenę różnych rodzajów hodowli hepatocytów (mono- i ko-kultur), a w szczególności analizę zachowania przez nie zdolności detoksyfikacji in vitro.

Planowane efekty naukowe i praktyczne

W ramach tematu będą prowadzone prace badawcze dotyczące realizacji trzech różnych metodologicznie zadań związanych z realizacją celu, których połączenie umożliwi szeroką ocenę zachowania, w tym również specyficznych funkcji, hepatocytów in vitro.

W zadaniu 1 będą prowadzone badania nad opracowaniem metodyki i narzędzi informatycznych umożliwiających porównanie zachowaniafibroblastów izolowanych z ludzkiej skóry oraz fibroblastów zmodyfikowanych genetycznie (tzn. stabilnie produkujących fluorescencyjne białka markerowe – EGFP i dsRed2 lub czynnik wzrostu – EGF), przygotowanych w ramach zadania 2. dotyczącego opracowania metody hodowli izolowanych ludzkich hepatocytów, umożliwiających długotrwałe utrzymywanie ich funkcji in vitro. Natomiast w ramach zadania 3 zostanie opracowany układ mikroprzepływowy do oznaczeń biochemicznych, w szczególności mocznika prowadzonych podczas hodowli komórkowych, np. monokultur hepatoacytów i kokultur hepatocytów z fibroblastami, m.in. w mikroreaktorze przepływowym. Zaproponowany mikroukład analityczny umożliwi długotrwałe monitorowanie hodowli hepatocytów, a w szczególności analizę zachowania przez nie zdolności detoksyfikacji amoniaku in vitro.

Uzyskany wynik będzie znaczącym udziałem w badaniach nad oceną różnego rodzaju hodowli hepatocytów i zachowania ich charakterystycznych funkcji, w tym również wskazanie optymalnego zestawu czynników pozwalających na długotrwałe hodowanie zróżnicowanych hepatocytów.

W przyszłości planuje się wykorzystanie tego typu układów w badaniach nad cytotoksycznością środków farmakologicznych dla potrzeb terapii spersonalizowanej.